Desarrollo de marcadores moleculares del tipo SCAR para la identificación de Azospirillum brasilense Az39 / Development of sequence characterized amplified región markers for identification of Azospirillum brasilense Az39

Resumen Azospirillum brasilense Az39 es utilizada por empresas productoras de inoculantespara la formulación de bioinsumos en América del Sur desde hace más de 30 a˜nos. Esta cepapuede promover el crecimiento, desarrollo, así como la capacidad de tolerar diferentes tiposde estrés en las plantas inoculadas, lo que determina un aumento de la productividad de culti-vos de interés agronómico. En la actualidad, no existen protocolos en Argentina que permitanconfirmar la identidad de Az39 en productos comerciales a nivel de laboratorios de control decalidad de inoculantes. Por ello, el objetivo de este trabajo fue desarrollar una metodología enbase molecular que permita la identificación certera de A. brasilense Az39. Con la secuenciacompleta del genoma y mediante herramientas bioinformáticas, se pudieron reconocer frag-mentos de ADN presentes únicamente en el genoma de Az39. Se dise˜naron cebadores dirigidosa amplificar por PCR dichas secuencias. Como resultado se observaron los productos específicosúnicamente en la presencia de la cepa de interés. La reacción pudo detectar un título mínimode 105UFC/ml (4,5 ng/l ADN) o de 102UFC/ml (0,88 ng/l ADN) o una concentración mínimade 0,098 ng/l ADN, dependiendo del método de extracción utilizado. Los cebadores fueronevaluados en el análisis de productos comerciales obtenidos del mercado nacional, arrojandoresultados positivos, tanto en muestras directas como así también en pruebas confirmatoriasa partir de colonias aisladas de tales productos. La metodología desarrollada en este trabajo,permite la detección certera de A. brasilense Az39 en cultivos puros o mezclas complejas demicroorganismos.

Abstract Azospirillum brasilense Az39 has been used since more than 30 years by several companies in South America for biofertilizers production. This strain may promote plants growth and development, as well as the ability of inoculated plants to tolerate environmental stresses, which determines an increase in the productivity under field conditions. At present, there are no protocols in Argentina to confirm the identity of Az39 in commercial products; however, such biofertilizers are formulated almost exclusively with this strain. Therefore, the objective of this paper was to develop a molecular methodology that allows the accurate identification of A. brasilense Az39. Using the complete genome sequence and several bioinformatics tools, fragments of DNA present only in the Az39 genome were recognized. A set of PCR primers to amplify these sequences were designed, and the specific products were observed only in the strain of our interest. The sensitivity of the methodology was evaluated, where the strain could be detected up to a titer of 105 CFU/ml (4.5 ng/pl ADN) or 102 CFU/ml (0.88 ng/pl DNA) or in a minimal concentration of 0.098 ng/pl DNA, depending on the DNA extraction methodology used. Primers were tested against direct samples of commercial inoculants and cultures, in both cases there were specifics products, both in direct samples and in confirmatory tests from isolated colonies from those products. The procedure presented in this paper allows the accurate identification of A. brasilense Az39 in pure cultures, mixtures of microorganisms, and commercial biofertilizers.

Tumor del estroma gastrointestinal y resolución laparoscópica: a propósito de un caso / Gastrointestinal tumor laparoscopic resolution: a case report

Paciente femenina 80 años acude por presentar epigastralgia, pirosis de 2 meses de evolución, se realiza endoscopia superior evidenciando lesión con compresión extrínseca en curvatura menor del estómago, biopsia negativa para malignidad, tomografía de abdomen y pelvis: tumor de 5 cm en curvatura y epiplón menor, eco endoscopia con punción: tumor que afecta pared muscular gástrica sin afección de mucosa sin extensión a órganos vecinos, punción: lesión fusocelular benigna, se plantea diagnóstico leiomioma vs. tumor del estroma gastrointestinal gástrico; se practica gastrectomía parcial vertical laparoscópica, márgenes macroscópicos negativos, evolución posoperatoria satisfactoria; biopsia definitiva: tumor del estroma gastrointestinal gástrico de bajo riesgo márgenes de 1 cm libres, valoración conjunta con medicina oncológica se decide en vista de las características biológicas resección quirúrgica completa, y edad de la paciente no amerita tratamiento adyuvante por lo que se mantiene en observación. La resección laparoscópica en el tratamiento de estos tumores gástricos es efectiva

Feminine patient 80 years present epigastralgia and pirosis 2 months of evolution, superior endoscopy is don edemonstrating an extrinsic lesion with compression in smaller curvature of stomach, whose negative biopsy for malignity, tomography of abdomen and pelvis reports 5 cm approximately tumor in smaller curvature and epiplon, endoscopic ultrasound with puncture reports: gastric muscular wall tumor without affection of mucosa without neighboring organ extension affects, and puncture injury:fusocelular benign, reason we considers: gastric diagnosis leiomioma vs. gastrointestinal stomach tumor; is taken a laparoscopic vertical partial gastrectomy, with margins macroscopic negatives, with satisfactory evolution post operating, definitive biopsy reports: tumor low risk with free margins of 1 cm; because for a complete surgical resection, in evaluation with oncologic medicine, decided in view of characteristics and age of the patient does not deserve adjuvant treatment reason why she stays in observation. Laparoscopic resection on this stomach tumor it’s an effective treatment

Adrenalectomía laparoscópica en Adenoma virilizante a propósito de un caso / Laparoscopy adrenalectomy in virilizant adenoma: a case report

Presentar un caso clínico. Paciente femenina de 40 años de edad IIIG IIIP enfermedad actual en 2007 con amenorrea, signos de virilización, fascie cushinoide, por lo cual acude a facultativo. Estudia con un perfil hormonal reportando en abril de 2009: prolactina 7,83, T3, T4, TSH sin alteraciones, estradiol elevado 280, progesterona en 0,4, FSH 9,7 LH 6,5, ultrasonido abdominopélvico reportando quiste de ovario izquierdo simple de 36 mm x 33 mm x 28 mm, volumen de 17,5 cm³, TAC abdomino-pélvica reporta imagen heterogénea capta contraste, contornos definidos en fosa suprarrenal derecha 4,8 cm de diámetro, sugestiva de adenoma suprarrenal, se aprecian aumento de volumen uterino sugestivo de fibromatosis y quiste de ovario derecho simple, catecolaminas urinarias y ácido vanidilmandélico normales, se decide tomar conducta quirúrgica definitiva, por lo que se solicita pre operatorio y el 17-02-10 fue llevada a adrenalectomía laparoscópica, con diagnóstico de adenoma suprarrenal virilizante. La biopsia definitiva reportó tumor epitelial benigno de células corticales adrenales (Adenoma adrenal cortical), sin invasión capsular necrosis ni pleomorfismos sin indicios de malignidad. La paciente fue dada de alta a las 24 horas, con posoperatorio inmediato satisfactorio, Presentando sangrado menstrual 1 mes posterior a la cirugía y reversión posquirúrgico de los signos de virilización. Los adenomas suprarrenales virilizantes son una patología rara pero cuando se presenta la clínica es inequívoca, se recomienda el abordaje laparoscópica de estas lesiones en pacientes bien seleccionados ya que el beneficio es indiscutible

Present a clinical case. Feminine of 40 years old IIIG IIIP initial start disease in 2007 with amenorrhoea, virilization signs, cushin fascies. Goes to facultative that studies with hormonal profile reporting in April of 2009: Prolactin 7.83, T3 T4 TSH without alterations, estradiol 280, progesterone in 0,4, FSH 9.7 LH 6.5, pelvic and abdominal ultrasound reporting cyst simple left ovary of 36 mm x33 mm x 28 mm and volume of 17.5 cm³, abdominal and pelvic TAC that reports heterogeneous image that catches contrast, contours defined in right adrenal grave 4.8 cm of diameter, suggestive of adrenal adenoma, also increase uterine volume of fibromatosis and cyst of straight simple ovary, urinary catecholamines and normal vanidilmandelic acid are appraised, reason by which it is decided to take definitive surgical treatment, reason why asks for pre operating studies and the 02-17-10 was taken to laparoscopic adrenectomy, with diagnosis of virilizant adrenal adenoma. The definitive biopsy report benign epithelial tumor of adrenal cortical cells (cortical adrenal adenoma), without capsular invasion necrosis non pleomorphic, without malignant suspicious items. The patient egresses to the 24 hours after surgery, with an immediate satisfactory post-operative, Presenting/displaying menstrual bleeding 1 month subsequent to the surgery and postsurgical reversion of the signs of virilization. The virilizant adrenal adenomas are a rare pathology but when the clinic appears is unequivocal, laparoscopic boarding of these injuries in selected patients is good recommended since the benefit is unquestionable

Enfermedad reumática cardiovascular: observaciones anatomopatológicas en biopsias valvulares de jóvenes con menor e igual a 20 años de edad / Cardiovascular rheumatic disease: pathologic´s observations in biopsies valvulares of young people minor and equal 20 years of age

La fiebre reumática es una enfermedad endémica en los países en desarrollo como Venezuela y es causa importante de valvulopatía crónica progresiva, siendo primeramente afectado el aparato valvular mitral. Evaluar el aspecto morfológico de la valvulitis crónica en su etapa inicial, en individuos quienes han sido sometidos a reemplazo valvular mitral o mitro-aórtico. Se seleccionaron 20 biopsias de válvulas mitrales y mitro/aórticas diagnosticadas como valvulopatía crónica reumática, representativas de la etapa inicial, en pacientes con edad igual o menos de 20 años. Los diagnósticos pre-operatorios fueron: disfunción valvular severa mitral (insuficiencia (60%), doble lesión (10%) y estenosis (5%) y mitro-aórtica (25%). Las biopsias (valvas y aparatos valvulares mitrales) fueron evaluadas macroscópicamente. El estudio histológico se hizo con secciones teñidas con Hematoxilina-eosina e inmunomarcadas con anticuerpos CD 34 y antimúsculo liso. Todos los casos mostraron lesiones morfológicas propias de la valvulitis crónica reumática inicial: inflamación grado 1 (81,6%), con nódulos de Aschoff (35%), fibrosis de grado 2 (40%) y 3 (60%) Con una alta densidad de neovascularización (14,78 ± 1,92). Se hizo el análisis de los hallazgos morfológicos y se consideró que este trabajo puede servir de base para investigaciones comparativas con casos de etapas más avanzadas de la enfermedad valvular en relación a la inflamación, remodelado colágeno y angiogénesis.

Rheumatic fever is an endemic disease in developing countries such as Venezuela and is an important cause of progressive chronic valve disease, the mitral valve apparatus being affected in the first place. To evaluate the morphologic aspect of chronic valvulitis in its initial stage among individuals that have gone through mitral and mitro-aortic valve replacement. Twenty (20) biopsies of mitral and mitro-aortic valves diagnosed with rheumatic chronic valvulopathy in its initial stage were selected from patients aged 20 years or younger. Preoperating diagnoses were as follows: severe mitral valve dysfunction (insufficiency: 60%, double injury: 10%, stenosis: 5%, and mitro-aortic: 25%). The biopsy material (valve apparatuses) was macroscopically evaluated. A histological study was made on haematoxylin-eosin stained and CD34 antibody immunomarked sections and smooth antimuscle. All cases showed morphologic lesions typical of initial chronic rheumatic valvulitis: grade 1 inflammation (81,6%), with Aschoff's bodies or nodules (35%), grade 2 fibrosis (40%), and grade 3 fibrosis (60%) with high density neovascularization (14,78 ± 1,92). Morphologic findings were analyzed, thus concluding that this work can serve as a basis for comparative investigations on case of valvular disease at more advanced stages in terms of inflammation, collagen remodeling and angiogenesis.

Biopsia por aspiración con aguja fina en el diagnóstico de lesiones de glándula salival / Fine needle aspiration for the diagnostic of salivary gland. Experience in the Oncology Institute Dr. Miguel Perez Carre¤o

Las patologías benignas y malignas de la glándula salival están ligadas a sus características anatomopatológicas, estas se encuentran en permanente revisión y su clasificación es controversial. La citología por punción con aguja fina ha surgido como una técnica m¡nimamente invasiva de diagnóstico en estas lesiones. La punción con aguja fina ha demostrado ser un método sencillo, barato, sensible y específico para el diagnóstico de neoplasias y lesiones no neoplásicas y permite distinguir casos quirúrgicos de no quirúrgicos. Se realizó un estudio descriptivo, retrospectivo, transversal y observacional. Se revisaron 47 historias con diagnóstico clínico de lesión en glándula salival, se revisaron los hallazgos histológicos disponibles en 33 casos para establecer la correlación cito histológicas. De 47 pacientes a los cuales se les realizó aspirados 11 fueron inadecuados y 36 suficientes o adecuados, inflamatorios 3 casos, neoplasia primaria benigna fueron 23 pacientes de los cuales 17 correspondieron a adenoma pleomórfico. 6 casos fueron neoplasia epitelial maligna, 1 neoplasia linfoide y 2 neoplasias metastásica. La punción con aguja fina de glándula salival es un método que ayuda a distinguir lesiones benignas de malignas, primarias de metastásicas; en este sentido persigue, y permite, establecer si se trata o no de un proceso tumoral, y en este último caso, determinar la naturaleza benigna o maligna del mismo, su carácter primario o secundario, posibilitando así una selección adecuada de tratamiento en esta patología salival entre un tratamiento médico o uno quirúrgico.

Cáncer papilar primario en quiste del conducto tirogloso: a propósito de un caso / Primary papillary cancer in thyroglossal cyst: case report

El conducto tirogloso es una anomalías congénita resultado de la retención del tracto epitelial entre la tiroides, el foramen cecum y el piso de la faringe. La aparición de un carcinoma en el quiste del conducto tirogloso es rara. Hasta donde sabemos se han publicado 150 casos en la literatura internacional. Presentamos un caso de carcinoma papilar en un quiste del conducto tirogloso tratado en nuestra institución, el cual representa el único caso tratado en nuestro departamento en un período de 17 años

Cáncer papilar primario en quiste del conducto tirogloso: a propósito de un caso / Primary papillary cancinoma in thyroglossal duct cyst: a proposal of a case

El conducto tirogloso es una anomalía congénita resultado de la retención del tracto epitelial entre la tiroides, el foramen cecum y el piso de la faringe. La aparición de un carcinoma en el quiste del conducto tirogloso es rara, menor del 1 por ciento. Hasta donde sabemos se han publicado 150 casos en la literatura internacional. Presentamos un caso de carcinoma papilar en un quiste del conducto tirogloso tratado en el Servicio de Cabeza y Cuello del Instituto de Oncología Dr. Miguel Pérez Carreño (centro de referencia nacional), el cual, representa el único caso tratado en nuestro Instituto en el lapso comprendido desde 1986 y el 2003, (17 años)

Tumor phyllodes de la mama: casuística de 15 años en el Instituto Oncológico Dr. Miguel Pérez Carreño Valencia / Phyllodes tumor of she suckles: her 15 year old casuistry in the Oncological Institute Dr. Miguel Pérez Carreño

El tumor phyllodes de la mama, es una neoplasia poco frecuente, de origen fibroepitelial con potencial agresivo, que representan el 0,3 por ciento de todos los tumores de mama. Se realizó un estudio retrospectivo, descriptivo, de las pacientes con diagnostico de tumor phyllodes de la mama, estudiadas en el servicio de ginecología y mamas del Instituto Oncológico "Dr. Miguel Pérez Carreño" de Valencia, Estado Carabobo, Venezuela. Durante el período comprendido entre los años 1986 y 2000. Un total de 858 pacientes con tumores fibroepiteliales, fueron diagnosticados durante este período, 31 pacientes (3,61 por ciento), presentaron el diagnóstico de tumor phyllodes. Todos estos casos se presentaron en forma unilateral, 17 pacientes (54,8 por ciento), presentaron afectación de la mama derecha. De los 31 casos, 20 fueron diagnosticados como benignos (64,6 por ciento) y 11 fueron malignos (35,5 por ciento), basándose en la hipercelularidad, plemorfismo, contaje mitótico y atipia del componente mesenquimal. El 80,6 por ciento de las pacientes tenían una edad menor o igual a los 50 años. El tamaño tumoral fue variable, sin embargo, de los 11 casos informados como malignos, 4 presentaron diámetros mayores a los 10 cm. De las 11 pacientes con tumores malignos, 9 (81,8 por ciento), fueron tratadas con mastectomías simples y 2 (18,2 por ciento) con mastectomías parciales. Solo 2 pacientes presentaron recurrencia local, a los 6 y 2 años de seguimiento respectivamente, una paciente presentó metástasis a cráneo y cadera, en el resto de las pacientes la evolución fue satisfactoria. En nuestra institución al igual que la reportada en la bibliografía, el tumor phyllodes es una entidad poco frecuente, que afecta principalmente a mujeres menores de 50 años

Tumores hepáticos primarios: estudio clínico-morfológico de 156 casos / Tumors hepaticos primary: study clinical-morphologic of 156 case

La incidencia de cáncer primario del hígado es variable en diferentes pacientes del mundo. En Venezuela, el carcinoma hepatocelular es considerado como de riesgo intermedio, superando la frecuencia observada en casi todos los países de Latinoamérica. Existe una relación entre carcinógenos y carcinoma hepatocelular, dentro de los cuales se mencionan el alcohol, los virus de la hepatitis B y C, la acumulación de cobre y hierro en el hígado, las aflatoxinas y la deficiencia de alfa 1 antitripsina. Por otra parte la relación con cirrosis está bien establecida, grases y colaboradores describieron una incidencia de cirrosis de 7,6 por ciento en 8.523 autopsias y 16 por ciento de carcinomas hepatocelulares. El objetivo del presente estudio es tratar de determinar la frecuencia de tumores hepáticos primarios en biopsias e intentar demostrar la posible asociación con otras lesiones hepáticas, por ejemplo la cirrosis